大鼠肝卵圆细胞GPC3表型亚群分离与鉴定
目的:分离纯化GPC3阳性卵圆细胞亚群,为深入探索原发性肝癌的分子发病机制奠定物质基础.方法:采用2-乙酰氨基芴结合三分之二肝切除术(2-AAF+2/3PH)构建大鼠肝卵圆细胞增殖模型,鉴定卵圆细胞标记蛋白-6(OV-6)、细胞角蛋白19(CK19)及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)的表达,通过酶消化结合Percoll梯度离心分离纯化卵圆细胞群,采用间接磁珠阳性技术进一步分选得到GPC3+/-卵圆细胞.结果:2-AAF(15mg/kg)/PH可成功诱导大鼠卵圆细胞增殖,模型组以术后第9~11天达增殖高峰,免疫组化能表达OV-6、CK19及GPC3三种抗原.两步酶消化法结合Percoll密度梯度离心及间接免疫磁珠分选技术所得卵圆细胞亚群OV-6、GPC3呈阳性表达.结论:2-AAF/PH可有效建立大鼠肝卵圆细胞增殖模型;通过间接免疫磁珠分选技术可分离纯化GPC3+卵圆细胞亚群,进一步证实GPC3为卵圆细胞的新型表面抗原.
肝卵圆细胞、GPC3、肝癌、免疫磁珠分选
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R392.12
2019-12-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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