两种乳腺癌患者血清来源的外泌体分离方法的比较

摘要：

目的:探索乳腺癌患者血清来源的外泌体最佳纯化条件,并对所得的外泌体进行形态鉴定和浓度测定,以期获得较优的分离血清来源外泌体的纯化方法. 方法:收集患者血清,分别用超高速离心法(Ultra-exo)和沉淀试剂盒法(Prekit-exo)分离提取外泌体.生物透射电镜负染上样观察外泌体生物学形态,并用纳米激光粒度跟踪测量仪(NTA)检测其粒径大小和粒径分布,用western blot来进行蛋白表征鉴定.结果:两种方法得到的外泌体,生物透射电镜下可见超高速离心获得的是具有典型半杯托状结构的外泌体,大小在 30~200nm 之间,而沉淀试剂盒法分离的产物不具有典型的外泌体形态,甚至有很多杂蛋白,且背景十分杂乱.此外,NTA显示超高速离心法得到的外泌体粒径分布均匀,在一个较窄的粒径范围(117.8±28.7nm).而沉淀试剂盒法所得产物在粒径分布上呈现多段粒径区间,分布范围宽(289.5±103.3nm).Western Blot结果显示,沉淀试剂盒法提取的外泌体杂蛋白多余超高速离心法. 结论:本实验结果表明,分离血清来源的外泌体,超高速离心法显然优于沉淀试剂盒法.

关键词：外泌体、分离、超高速离心、沉淀试剂盒法

所属期刊栏目：16

分类号：R3411(人体生物化学、分子生物学)

在线出版日期：2019-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：82-86