脐血源树突状细胞的扩增及其杀肿瘤细胞效应研究
目的:探讨不同细胞因子组合对脐带血来源的树突状细胞(Dendritic cells,DC)扩增率的影响,优化扩增方案,并对所诱导的脐带血DC的生物学特征进行鉴定.方法:收集健康孕妇正常顺产儿脐带血,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,加入不同组合的细胞因子,联合诱导脐带血单个核细胞前体细胞分化为DC.然后对诱导细胞进行流式细胞仪检测,其中包括CD83,CD1a在DC表面的表达.激光共聚焦显微镜观察DC的形态.用MTT法检测所诱导的DC活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤效应.结果:单个核细胞经细胞因子诱导后第3d成均匀散在分布的细胞,部分细胞变形,胞体拉长;第7d可见胞浆突起,细胞形态不规则,呈疏松贴壁生长或悬浮生长;第12d细胞集落样生长,具有典型的DC特征.检测所诱导的DC活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤效应,实验组DC活化的T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤效应明显优于对照组.结论:采取细胞因子GM-CSF、IL-4、FL、SCF联合刺激成功诱导出形态典型、纯度较高的脐带血DC,收获的细胞数比常规方案(加细胞因子GM-CSF、IL-4)明显增多.优化方案所诱导的DC能增强T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤效应.
脐带血、树突状细胞、细胞因子
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Q786(基因工程(遗传工程))
湖南省教育厅科学研究项目09C625;2009年“国家大学生创新项目计划”2010040
2013-04-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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