RNA干扰质粒pcDU6的构建及其应用

摘要：

目的:根据RNAi的原理自主构建一个真核表达的RNAi载体pcDU6.方法:从人的gDNA中克隆出U6promoter(-315～+1),将其与BglⅡ和ApaⅠ双酶切的pcDNA3.1(-)质粒大片段酶连,转化JM109大肠杆菌,抽取阳性质粒测序证实,与GFP转染HT1080细胞;干扰肝癌细胞的AFP基因了解干扰效果.结果:pcDU6成功构建转染带有干扰AFP基因表达的RNAi质粒使肝癌细胞的能明显抑制AFP基因的表达(P＜0.01),转染质粒后Hep-3B细胞生长明显被抑制(P＜0.01).结论:pcDU6是一个有效的真核表达的RNAi干扰载体.

关键词：RNA干扰、U6promoter、pcDU6、AFP

所属期刊栏目：4

分类号：R397

资助基金：医学遗传学国家重点实验室主任基金2002;中南大学校科研和教改项目2002

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-5,14