10.3969/j.issn.1673-016X.2005.01.008
IL-3基因cDNA的克隆、测序及其在脐血造血干细胞中的表达
目的:克隆人IL-3基因cDNA,构建真核表达质粒并转导脐带血造血干细胞(HSC),探讨IL-3在HSC中的表达情况,从而为脐血HSC扩增及移植奠定基础.方法:从人外周血单个核细胞中提取IL-3 mRNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增IL-3 cDNA,通过T/A克隆法,构建真核表达型载体pcDNA3/IL-3.将pcDNA3/IL-3质粒转导脐血HSC,并于1~7 d检测IL-3表达情况.结果:pcDNA3/IL-3重组质粒的插入基因与IL-3基因序列相同;pcDNA3/IL-3转导脐血HSC后,经检测能够有效表达.结论:成功克隆了hIL-3基因cDNA并构建了重组质粒pcDNA3/IL-3,该质粒转导脐血HSC后,能在短期内有效表达.
IL-3、克隆、测序、表达、造血干细胞
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R3(基础医学)
河北省自然科学基金303528
2007-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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34-39