女贞ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

利用单因子试验,测试了女贞ISSR-PCR 反应体系中的主要影响因子.经过优化实验,建立了一套适合于女贞的稳定的ISSR-PCR 反应体系:10× buffer 2.5 μL,2.0 mmol·L-1 的MgCl2,200 μmol·L-1 的dNTPs,1.5 U的Taq 酶,0.4的μmol·L-1 的引物,10 ng的DNA 模板.PCR 扩增程序为:94 ℃预变性4 min,94 ℃变性40 s,52～62 ℃退火45 s,72 ℃延伸120 s,进行35 个循环,72 ℃延伸8 min,4 ℃保存.应用该优化的ISSR-PCR 实验体系对12 份女贞种质材料进行了扩增,均能扩增出丰富稳定的条带.

关键词：女贞、ISSR、影响因子、体系优化

所属期刊栏目：1

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目39860048

在线出版日期：2010-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：99-104