miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响

摘要：

为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN302为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miR-M11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN302ΔM11(克隆号C58-8-4).经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miR-M11 被精确编辑并从病毒基因组 中完全缺失,且未发生回复突变.病毒增殖曲线绘制结果显示,miR-M11 缺失毒株 HN302AM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN302(P＜0.05).综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力.

关键词：马立克病、miR-M11、微小RNA、CRISPR/Cas9、基因编辑、qPCR、复制

所属期刊栏目：52

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;河南省自然科学基金;河南省农业科学院自主创新项目

在线出版日期：2023-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：134-143