鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

为研制鸡异质核糖核蛋白AB(hnRNPAB)单克隆抗体,为其生物学功能研究提供关键试剂,构建重组质粒pET-30a-hnRNPAB,转化感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并通过树脂Ni对可溶性表达的鸡hnRNPAB蛋白进行亲和层析纯化之后免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术制备抗鸡hnRNPAB的单克隆抗体细胞株,最终通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选获得1株单克隆抗体杂交瘤细胞株5H2-H1.间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分析表明,5H5-H1单克隆抗体可特异性识别鸡胚成纤维细胞(CEF)表达的hnRNPAB蛋白.同时IFA和间接免疫细胞化学试验(ICA)结果还显示,除了特异性识别鸡hnRNPAB蛋白之外,5H5-H1单克隆抗体还可以与源自人、鼠、猴、牛和猪在内的5种常见哺乳动物细胞系表达的hnRNPAB发生特异性反应.

关键词：鸡、异质核糖核蛋白、单克隆抗体、间接免疫荧光试验、Western blot分析、间接免疫细胞化学试验

所属期刊栏目：51

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;河南省重点研发与推广专项;河南省自然科学基金面上项目;河南省农业科学院自主创新项目

在线出版日期：2022-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：127-132