马铃薯M病毒微滴数字PCR检测方法的建立

摘要：

为了建立马铃薯M病毒(Potato virus M,PVM)的精准检测技术,根据PVM外壳蛋白基因核苷酸保守序列设计微滴数字PCR(ddPCR)的引物、探针,建立PVM的ddPCR检测技术.以田间采集并经RT-PCR验证的PVM及其他4种同样可侵染马铃薯的病毒(PVX、PVY、CMV、TMV)总RNA为模板,进行ddPCR特异性分析;对PVM的总RNA进行10倍梯度稀释并用作模板,进行ddPCR灵敏度测定.结果表明,建立的ddPCR方法可以特异性地检测马铃薯上的PVM,与实时荧光RT-PCR结果一致;最低可检测5.7 fg/μL的总RNA,比实时荧光RT-PCR灵敏度高100倍.说明建立的ddPCR检测方法可用于PVM的准确鉴定.

关键词：马铃薯、马铃薯M病毒、微滴数字PCR、实时荧光RT-PCR、检测

所属期刊栏目：47

分类号：S436.32(病虫害及其防治)

资助基金：“十三五”国家重点研发计划项目2016YFF0203203

在线出版日期：2018-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：69-74