鸡3种主要DNA病毒多重感染复合PCR检测方法的建立

摘要：

依据GenBank中注册的鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物,3种病毒各设计3对引物,共计9对引物,经生物学软件筛选后,得到3对相互匹配较佳的引物.3对匹配引物经单一PCR验证后,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度;经特异性、敏感性试验及简化PCR试验,建立简易复合PCR检测方法.复合PCR扩增出的3条带大小与预期一致,即228 bp(MDV)、400 bp (ILTV)、499 bp (FPV);建立的复合PCR方法能同时检测出100 fg MDV、ILTV、FPV的DNA.同时依据PCR技术原理,将经典的三温热循环改进为二温热循环试验,即将退火和延伸合并为一步(62℃),缩短了反应时间.建立的3种病毒的复合PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可以用于临床病料的快速诊断.

关键词：马立克氏病病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡痘病毒、DNA病毒、复合PCR

所属期刊栏目：46

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项201303033

在线出版日期：2017-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：101-105