10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.08.026
抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达
为制备抗鹅α-干扰素的单链抗体,以抗鹅α-干扰素的杂交瘤细胞株总RNA为模板,RT-PCR法扩增鹅α-干扰素的抗体轻、重链基因,再采用SOE-PCR法,以编码柔性多肽(Gly4Ser)3为接头,组装出完整的鹅α-干扰素的单链抗体可变区片段(ScFυ)基因,并将ScFv基因克隆到pGEMT-Easy载体中进行测序分析,将测序正确的ScFυ基因片段克隆入pET-30a载体中进行诱导表达.结果显示,成功组装了ScFv基因,其全长为726 bp,为VH-Linker-VL结构,其中VH长357 bp、VL长324 bp,成功表达了ScFv蛋白,大小为27 ku.
鹅、α-干扰素、单链抗体、测序、表达
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S852.4(动物医学(兽医学))
江苏省“六大人才”高峰第十二批培养对象支助项目10410015002;江苏省农业科技支撑计划BE2014380;江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目;江苏农牧科技职业学院重点支持项目NSFZD1405,NSFPT201510,NSFPT201512
2016-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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