山茱萸RAPD反应体系的正交优化研究

摘要：

为了优化山茱萸RAPD反应条件,采用改良CTAB法提取山茱萸基因组DNA,并采用三因素三水平正交试验对RAPD反应体系中Mg2+、dNTP、引物浓度进行初步优化,在此基础上,对温度条件进一步优化.结果表明:在25μL的RAPD反应体系中各因素的最佳浓度分别为1.925mmol/LMg2+ 、0.275 mmol/L dNTPs、0.55 μmol/L引物、DNA模板40 ng和1U Taq DNA聚合酶；引物Tm为36.9℃时,最佳退火温度为35℃；引物Tm为41.0℃时,最佳退火温度为38℃.在最优反应条件下,对100种随机引物进行RAPD扩增,其中93种随机引物均扩增出条带,建立了可靠的反应体系和反应程序,为山茱萸的DNA指纹图谱鉴定建立了基础.

关键词：山茱萸、正交优化、随机引物扩增多态性DNA、DNA指纹图谱

所属期刊栏目：41

分类号：S567.23+9(经济作物)

资助基金：国家级大学生创新性实验计划项目101045902

在线出版日期：2012-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：113-116