农杆菌介导尖孢镰刀菌西瓜专化型转化体系的建立及突变体筛选
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10.3969/j.issn.1004-3268.2012.01.021

农杆菌介导尖孢镰刀菌西瓜专化型转化体系的建立及突变体筛选

引用
以尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)FO-11-06菌株为受体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,实现了农杆菌AGL1(含pATMT1)介导的西瓜枯萎病菌的转化,并研究了转化介质和pH值对转化效率的影响.结果表明:在25℃下,采用乙酰丁香酮(AS)浓度为200 μmol/L、农杆菌OD600=0.15、尖孢镰刀菌分生孢子含量为1×106个/mL、pH值为5.1~5.8时可实现T-DNA的插入转化.当转化体系pH值为5.3时,转化效率最高,达到每106个分生孢子产生553个转化子.不同共转化介质对转化效率影响明显,玻璃纸和硝酸纤维素滤膜转化效率较高,每106个分生孢子获得551个和549个转化子,显著高于滤纸.通过转化,获得尖孢镰刀菌西瓜专化型转化子1 989个,对生长速度、菌落颜色和产孢量等性状进行分析,发现有46个性状特异的突变体.研究结果为进一步研究尖孢镰刀菌西瓜专化型的生长发育、致病机制和相关基因的功能奠定了基础.

尖孢镰刀菌西瓜专化型、农杆菌、T-DNA插入转化、转化效率

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S476(各种防治方法)

国家西甜瓜产业技术体系专项经费资助项目CARS-26-33

2012-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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河南农业科学

1004-3268

41-1092/S

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2012,41(1)

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