小麦内质网氧化还原酶在毕赤酵母中的表达

摘要：

为开发健康天然的新型酶制剂型面粉改良剂,利用毕赤酵母重组表达了小麦内质网氧化还原酶1(wEro1);将wero1基因亚克隆至毕赤酵母表达载体pPICZαA,实现了wEro1在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中的分泌表达,优化诱导表达条件后wEro1的产量可达(53.24±2.11) U/mL;应用硫酸铵沉淀和阴离子交换层析纯化了wEro1,对电泳纯wEro1进行酶学性质研究.结果表明:wEro1具有催化二硫键异构酶(PDI)的巯基氧化活性,且最适pH为7.5,最适温度为30℃;在低温和中性pH条件下,该酶具有较好的稳定性.将毕赤酵母重组wEro1添加到面粉中,考察其对面粉加工品质的影响,发现毕赤酵母重组wEro1改善面粉粉质特性的能力比大肠杆菌重组wEro1更强.

关键词：小麦内质网氧化还原酶1、重组蛋白、巯基氧化、面粉粉质

所属期刊栏目：47

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目31471691,31771906

在线出版日期：2019-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：57-63,70