人酸性成纤维细胞生长因子的高效表达

摘要：

构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)的基因工程菌,优化产物分离纯化条件,并对纯化产物进行理化性质鉴定.采用PCR方法扩增haFGF cDNA,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中,筛选得到了重组质粒pET3c-haFGF,转化大肠杆菌BL21(DE3),构建了表达菌株BL21(DE3)/pET3c-haFGF.IPTG诱导表达,通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化产物.用MTT法测定产物的活性.haFGF的表达量约为20%.经过两步层析纯化,获得了电泳纯的haFGF样品.纯化haFGF样品的比活性为ED50小于4.0 ng/mL.BL21(DE3)/pET3c表达系统能高效表达haFGF,经过纯化得到了理化性质及生物活性与天然haFGF对照品一致的重组人酸性成纤维细胞生长因子.

关键词：人酸性成纤维细胞生长因子、诱导表达、分离纯化

所属期刊栏目：29

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：61-64