嵌有非天然氨基酸蛋白质的生物合成及其纯化鉴定

摘要：

基于基因密码子扩展技术,构建能够嵌入非天然氨基酸pBpa蛋白质的大肠杆菌BL21(DE3)双质粒原核表达工程菌株,原核表达后,通过Ni-NTA纯化介质的初步纯化以及AKTA蛋白纯化系统的Superdex75分子筛进一步精细纯化,获得了在IL-1β的5号预设位点上嵌入了非天然氨基酸pBpa的嵌合体蛋白,并且通过质谱确认pBpa在预设位点的精准插入.本研究证明基于密码子扩展技术构建的双质粒工程菌可以将非天然氨基酸pBpa插入到IL-1β的特定位点,能够生物合成并纯化出大量的非天然氨基酸嵌合体蛋白质,这为其他非天然氨基酸或其他功能蛋白及其特异性位点的非天然氨基酸嵌合蛋白的生物合成奠定了基础.

关键词：非天然氨基酸;pBpa;基因密码子扩展技术;白细胞介素-1β

所属期刊栏目：39

分类号：Q786;Q599(基因工程（遗传工程）)

资助基金：郑州师范学院大学生创新性实验计划;国家自然科学基金面上项目;河南省自然科学基金项目;国家级大学生创新创业训练计划

在线出版日期：2021-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1245-1249