雨生红球藻胡萝卜素酮基化酶体外固定化催化研究

摘要：

[目的]虾青素是具有广阔市场前景的抗氧化剂原料,本研究旨在利用探索虾青素合成关键酶胡萝卜素酮基化酶体外固定化后体外合成虾青素的可行性,为开发环境友好的虾青素合成新方法提供依据.[方法]利用源于雨生红球藻的胡萝卜素酮基化酶mRNA序列,通过密码子优化、质粒构建和感受态大肠杆菌转染、IPTG诱导来表达含组氨酸标签的胡萝卜素酮基化酶融合蛋白,通过Ni-NAT镍柱来纯化,继而采用琼脂糖凝胶多孔性微珠固定装载有酶蛋白的脂质体,以胡萝卜素为底物在体外开展固定化酶催化反应研究,并探讨多种表面活性剂对酶活性的影响.[结果]成功表达和制备了组氨酸标签化的胡萝卜素酮基化酶在体外固定化酶反应中,有脱氧胆酸钠存在时,该酶显示了最高活性,其表观反应速率常数为1.9μg胡萝卜素·mg酶-1·h-1.[结论]雨生红球藻胡萝卜素酮基化酶体外固定化转化胡萝卜素具备可行性.

关键词：虾青素、胡萝卜素酮基化酶、异源表达、固定化酶

所属期刊栏目：9

分类号：TS275.5(食品工业)

资助基金：广西壮族自治区重点研发计划项目;广西壮族自治区分析测试中心自主项目

在线出版日期：2022-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：83-88