10.3969/j.issn.1671-6361.2008.04.014
肺炎嗜衣原体主要外膜蛋白基因片段在大肠杆菌中的表达与鉴定
表达肺炎嗜衣原体(chlamydia pneumoniae,Cpn)主要外膜蛋白(MOMP)的可变区VD2-VD3区,纯化产物并进行免疫活性分析,为探索重组蛋白在肺炎嗜衣原体血清学诊断中的应用提供资料.应用聚合酶联反应(PCR)技术,从肺炎嗜衣原体标准株AR-39的MOMP上扩增出抗原优势表位VD2-VD3区,将目的片段定向插入pET-30a载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并以Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物并行westem-blot鉴定.成功构建了pET-30a-MOMPVD2-VD3的原核表达系统,表达并纯化出相对分子质量(Mr)为24×103Da的重组蛋白.Western-blot证实重组蛋白能与Cpn MOMP多克隆抗体发生特异性反应.肺炎嗜衣原体的MOMPVD2-VD3基因可以在大肠杆菌中得到表达,其表达产物能与相应的抗体结合,为肺炎嗜衣原体诊断候选抗原的研究奠定了基础.图4,参9.
肺炎嗜衣原体、主要外膜蛋白(MOMP)、基因表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
湖南省卫生厅重点课题资助项目A03-006
2009-04-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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