人脑蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1基因克隆与原核表达

摘要：

从人脑组织中提取mRNA,通过RT-PCR扩增出目标cDNA,构建蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1 pEASY-E1重组质粒.将重组质粒转化进E.coli TOP10感受态细胞中,筛选阳性克隆进行验证,将测序正确的质粒转化到E.coli Transetta感受态细胞中表达SHP-1.进一步对SHP-1表达的诱导温度和IPTG浓度等条件进行优化.结果显示,所克隆的SHP-1基因片断经PCR鉴定和测序分析,与目标基因完全相符.通过蛋白表达条件的优化,发现20℃,0.4 mmol/L IPTG对表达菌株进行诱导时,SHP-1可溶性蛋白表达量最大.

关键词：SHP-1、基因克隆、蛋白表达

所属期刊栏目：43

分类号：Q986(人类学)

资助基金：国家自然科学基金资助81273652

在线出版日期：2014-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：435-438