低温冻存基质细胞特性的研究

摘要：

目的探讨骨髓细胞低温冻存后贴壁基质细胞培养生长的基本特性,为低温冻存基质细胞的应用提供实验依据.方法取新鲜骨髓和经Dexter长期培养法培养14 d的骨髓贴壁基质细胞(称"新鲜基质细胞"),用5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉为保护剂,-80℃冰箱降温,-196℃液氮冻存(前者称"冻存骨髓",后者称"冻存基质细胞")2周,复温后,再用Dexter法培养这些细胞,检测细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓造血细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞等为指标,比较它们的生长特性、成分及功能.结果生长特性:冻存骨髓比新鲜骨髓出现贴壁细胞、细胞丛和细胞融合成片迟1～2 d,冻存基质细胞融合成片比新鲜基质细胞迟12～18 h;冻存骨髓与新鲜骨髓,冻存基质细胞与新鲜基质细胞增殖数比明显低.细胞成分:冻存骨髓比新鲜骨髓形成的成纤维细胞、内皮细胞比率下降,而巨噬细胞和脂肪细胞比率升高,冻存基质细胞上述现象更明显;内含凋亡小体的细胞冻存基质细胞多于新鲜基质细胞,冻存骨髓细胞多于新鲜骨髓;冻存骨髓和冻存基质细胞台盼蓝拒染率分别为95.2%、89.5%;冻存骨髓、冻存基质细胞CD14、人白细胞DR抗原表达百分率比新鲜骨髓、新鲜基质细胞高,CD45、CD33反之.细胞功能:新鲜骨髓、新鲜基质细胞、冻存骨髓和冻存基质细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞,生长良好,无显著差异.结论不管是骨髓细胞还是经培养生成的贴壁基质细胞,经5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉冷冻冻存、复温后培养,生物特性有一定损伤,但仍有较好的支持造血功能.

关键词：低温冻存、骨髓细胞、基质细胞

所属期刊栏目：15

分类号：R331.1(人体生理学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：137-140