非编码RNA hsa_circ_0066367在PM2.5致人支气管上皮细胞炎症反应中的作用及相关机制研究

摘要：

目的 探究环状RNAhsa_circ_0066367 在PM2.5 致人支气管上皮细胞(16HBE)炎症反应中的调控作用机制.方法 将 0、100 和 300 μg/ml浓度的PM2.5 染毒 16HBE细胞 48h后,用实时荧光定量PCR分析法检测细胞中IL-1β、IL-8 与hsa_circ_0066367 的表达.以RNase R酶处理验证hsa_circ_0066367 成环性.接着,利用RNA干扰技术沉默 16HBE细胞中hsa_circ_0066367,再联合暴露染毒于 300 μg/ml的PM2.5 后,使用RT-qPCR检测细胞内IL-1β与IL-8 的表达水平变化.同时,利用生物信息学方法预测hsa_circ_0066367可能结合的miRNA,及目标miRNAs的下游靶基因,并对下游靶基因进行功能富集分析,成功构建与PM2.5 致 16HBE炎症相关的circRNA-miRNA-mRNA的调控互作网络.结果 PM2.5 染毒 16HBE细胞后,细胞中炎症因子IL-1β、IL-8 与hsa_circ_0066367 表达量升高.沉默细胞内hsa_circ_0066367 表达水平后再经 PM2.5 染毒,16HBE 细胞中 IL-1β 与 IL-8 的 mRNA 表达水平下降.生物信息学预测软件分析发现hsa_circ_0066367 可能通过作为hsa-miR-1290 与hsa-miR-622 分子的"海绵"吸附体发挥其调控作用,GO功能和KEGG通路分析表明,hsa-miR-1290 与hsa-miR-622 分子的下游靶基因主要参与有丝分裂核膜分解、转录调控、蛋白质苏糖化等生物学进程,以及在ErbB信号通路、Wnt信号通路与MAPK信号通路等炎症相关通路中富集.结论 hsa_circ_0066367在PM2.5 染毒 16HBE细胞后发生异常高表达,并可能作为hsa-miR-1290 与hsa-miR-622 分子的"海绵"吸附体发挥其在PM2.5 染毒引起的 16HBE细胞炎症反应中的调控作用.

关键词：PM2.5、hsa_circ_0066367、人支气管上皮细胞、炎症反应、hsa-miR-1290、hsa-miR-622

所属期刊栏目：39

分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：广州市科技计划项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;广东省科技计划项目

在线出版日期：2023-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：23-28