10.3969/j.issn.1001-5914.2021.09.002
ERK信号通路在砷致LX-2细胞活化过程中对SMAD通路的调控作用
目的 探究细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在亚砷酸钠活化的人肝星状细胞(LX-2细胞)中对SMAD通路的调控作用.方法 将LX-2细胞分为3组:对照组、亚砷酸钠组、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制组.ERK抑制组用10.0μmol/LERK抑制剂(PD98059)预先干预LX-2细胞30 min,再加入20.0μmol/L亚砷酸钠培养24 h;对照组不加亚砷酸钠和抑制剂;亚砷酸钠组不加抑制剂.体外培养LX-2细胞,分别以含0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L亚砷酸钠的培养液染毒24 h,采用CCK8法检测细胞存活率.采用蛋白印迹法(Western blot)检测LX-2细胞内42KD、44KDERK、42KD、44KDp-ERK、SMAD2、p-SMAD2、SMAD3和p-SMAD3蛋白表达水平.采用实时荧光定量PCR法检测LX-2细胞内PAI-1 mRNA水平.结果 与对照组相比,除2.5μmol/L亚砷酸钠组LX-2细胞存活率增高外,5.0~80.0μmol/L亚砷酸钠组LX-2细胞存活率均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05).亚砷酸钠组细胞内42KD、44KD p-ERK表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),ERK抑制剂组细胞中42KD、44KD p-ERK表达水平低于亚砷酸钠组,差异具有统计学意义(P<0.05).亚砷酸钠组细胞中p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ERK抑制剂组细胞中p-SMAD2、p-SMAD3蛋白表达水平明显低于亚砷酸钠组,差异具有统计学意义(P<0.05).亚砷酸钠组细胞中PAI-1 mRNA表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),ERK抑制剂组细胞中PAI-1 mRNA表达水平低于亚砷酸钠组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 ERK信号通路在砷致LX-2细胞活化过程中通过p-SMAD2、p-SMAD3和PAI-1参与调控SMAD通路.
砷、人肝星状细胞、细胞外信号调节激酶、SMAD通路
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R994.6(毒物学(毒理学))
国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;贵州省高等学校工程研究中心KY2021008
2022-10-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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