N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对二氧化硅致大鼠矽肺纤维化中巨噬细胞活化的调节作用

摘要：

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对巨噬细胞活化的调控在抑制矽肺纤维化中的作用.方法 采用动式染尘自动控制系统构建矽肺大鼠模型.为观察矽肺纤维化发生过程中巨噬细胞的活化及表型转变情况,将SPF级雄性Wistar大鼠分为染尘组(染尘4周组和染尘16周组)、对照组(对照4周组和对照16周组);为观察Ac-SDKP对巨噬细胞活化与胶原沉积的调控作用,将SPF级雄性Wistar大鼠分为对照组、染尘组、Ac-SDKP[800μg/(kg·d)]干预组.将小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)分为对照组、SiO2诱导组(50μg/ml SiO2,诱导24 h)、Ac-SDKP处理组[Ac-SDKP(10-8 mol/L)+50μg/ml SiO2],确定SiO2诱导RAW264.7细胞的适宜浓度与作用时间,并观察Ac-SDKP对SiO2诱导巨噬细胞活化的调控作用.以免疫组化法检测Ⅰ型巨噬细胞标记物(iNOS)、Ⅱ型巨噬细胞标记物(Arg-1)在肺组织的分布与定位情况.以Western blot法检测巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、iNOS、Arg-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(COLI)在肺组织和RAW264.7细胞中的表达变化.结果 免疫组化结果显示,在染尘4周大鼠肺组织病变区域可见较多iNOS阳性表达的M1型巨噬细胞,也可见Arg-1阳性表达的M2型巨噬细胞.在染尘16周大鼠肺组织矽结节内可见少量iNOS阳性表达的M1型巨噬细胞和较多Arg-1阳性表达的M2型巨噬细胞.与染尘组大鼠比较,Ac-SDKP干预组iNOS和Arg-1在矽结节内阳性表达的细胞数量减少.Western blot法检测结果显示,与相应对照组比较,染尘4周、16周组肺组织中iNOS、Arg-1蛋白表达均上调(P<0.05);其中染尘16周组与染尘4周组比较,iNOS蛋白表达下调,而Arg-1蛋白表达进一步上调(P<0.05).与对照组比较,染尘组MCP-1、iNOS、Arg-1、α-SMA和COLI蛋白表达均上调(P<0.05).与染尘组比较,给予Ac-SDKP干预后MCP-1、iNOS、Arg-1以及α-SMA和COLI蛋白表达均下调(P<0.05).与对照组比较,SiO2诱导RAW264.7细胞的MCP-1、iNOS和Arg-1蛋白表达水平均上调(P<0.05);与SiO2诱导组比较,Ac-SDKP处理组MCP-1、iNOS、和Arg-1蛋白表达水平均下调(P<0.05).结论 矽肺纤维化发生、发展过程中伴随有巨噬细胞活化和表型转变的过程,而Ac-SDKP可能通过调控巨噬细胞的活化而发挥其阻抑矽肺纤维化的作用.

关键词：矽肺、巨噬细胞、N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸、一氧化氮合酶、精氨酸酶-1

所属期刊栏目：38

分类号：R(医药、卫生)

资助基金：国家自然科学基金;河北省高等学校科学技术研究项目;河北省自然科学基金;华北理工大学研究生创新项目

在线出版日期：2022-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：20-25