苯并(a)芘和邻苯二甲酸二丁酯联合染毒对L02细胞STAT3及p-STAT3水平的影响

摘要：

目的 探讨苯并(a)芘[benzo(a)pyrene,BaP]和邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)体外染毒对人正常肝细胞(L02)细胞信号传导与转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的表达及其活化(p-STAT3)的影响.方法 将体外培养的L02细胞分为对照组(0.1％ DMSO)、BaP低、中、高剂量单独染毒组(12.5、25.0、50.0 μmol/L BaP)、DBP低、中、高剂量单独染毒组(25.0、50.0、100.0μmol/LDBP)和BaP、DBP低、中、高剂量联合染毒组(12.5μmol/L BaP+25.0 μmol/L DBP、25.0 μmol/L BaP+50.0μmol/L DBP、50.0 μmol/L BaP+100.0 μmol/L DBP).染毒72 h后,用倒置显微镜观察细胞形态,应用实时荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测各染毒组STA T3 mRNA的表达水平,免疫印迹(Western blot)方法观察STAT3和p-STAT3蛋白的表达水平.结果 细胞染毒72h后,12.5 μmol/L BaP、25.0 μmol/L DBP和12.5 μmol/L BaP+25.0 μmol/L DBP低剂量染毒组的细胞形态改变不明显,仅少量细胞的细胞壁模糊;25.0 μmol/L BaP、50.0 μmol/L DBP和25.0 μmol/L BaP+50.0 μmol/LDBP中剂量染毒组细胞开始出现模糊,部分细胞由不规则形变为椭圆形,细胞间隙变大;50.0 μmol/L BaP、100.0 μmol/LDBP和50.0μmol/L BaP+100.0μmol/L DBP高剂量染毒组贴壁细胞数量减少,漂浮细胞增多,胞体缩小变圆,细胞间隙明显变大,细胞核增大;BaP、DBP联合染毒组较其对应的单独染毒组细胞形态学改变明显.与对照组相比,除12.5 μmol/LBaP、25.0 μmol/L BaP、25.0 μmol/L DBP和12.5 μmol/L BaP+25.0 μmol/L DBP组外,其余各染毒组的STA T3 mRNA表达水平皆明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).BaP、DBP联合染毒组中,中剂量组(25.0 μmol/L BaP+50.0 μmol/L DBP)的STA T3 mRNA表达水平明显低于BaP中剂量单独染毒组(P＜0.05),高剂量组(50.0 μmol/L BaP+100.0 μmol/L DBP)的STA T3 mRNA表达水平明显低于BaP、DBP高剂量单独染毒组(P＜0.05).与对照组相比,除12.5 μmol/L BaP、25.0 μmol/LBaP、25.0 μmol/L DBP和12.5 μmol/L BaP+25.0 μmol/L DBP组外,其余各染毒组STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平皆明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).BaP、DBP联合染毒组中,除低剂量组(12.5 μmol/L BaP+25.0 μmol/L DBP)外,中(25.0μmol/L BaP+50.0 μmol/L DBP)、高(50.0 μmol/LBaP+100.0 μmol/L DBP)剂量组的STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平皆明显低于各BaP、DBP中、高剂量单独染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BaP、DBP染毒可下调L02细胞的STA T3转录表达水平,抑制STAT3的活化(p-STAT3)程度,尤以BaP、DBP联合染毒时抑制作用更为明显.此可能是BaP、DBP致肝细胞凋亡损伤的重要环节.

关键词：BaP、DBP、L02细胞、STAT3、p-STAT3

所属期刊栏目：36

分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省区域内一流学科建设项目-公共卫生与预防医学

在线出版日期：2020-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：975-979