CHOP通路在邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯联合暴露致小鼠睾丸间质细胞凋亡中的作用

摘要：

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM-3)凋亡过程中CHOP通路的作用.方法 将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于0(对照)、50、100、200、400、800 μmol/L的MBP和(或)MEHP溶液24、36、48 h后,采用CCK-8法测定细胞活性.将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)、MBP(400 μmol/L)、MEHP(400 μmol/L)和MEHP(400 μmol/L)+MBP(400 μmol/L)溶液24 h后,电镜下观察小鼠睾丸间质细胞内质网超微结构的变化.将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)及200、400、800 μmol/L MBP和(或)MEHP溶液24h,流式细胞术检测细胞早期凋亡情况,免疫印迹法检测内质网应激标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CHOP的表达水平.结果 与对照组相比,各浓度MBP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势.随着MBP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除100 μmol/L组呈上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P＜0.05);且随着MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势.随着MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率在50 μmol/L组呈上升趋势,在100 μmol/L组呈先下降后上升的趋势,在400 μmol/组呈下降趋势,200μmol/L和800 μmol/L组抑制率呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MBP+MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP+MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈现上升趋势.随着MBP+MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除200、400 μmol/L组呈现逐渐上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MBP和(MEHP)染毒组TM-3细胞的早期凋亡细胞比例均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着染毒浓度的升高,MBP、MEHP和MBP+MEHP染毒小鼠睾丸间质细胞的早期凋亡细胞比例均呈现上升趋势.在同一染毒浓度下,睾丸间质细胞早期凋亡比例依次为MBP+MEHP＜ MBP＜MEHP,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,各浓度MBP和(或)MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞内GRP78和CHOP蛋白的表达水平均增加,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着染毒浓度的升高,MBP和(或)MEHP染毒小鼠睾丸间质细胞内GRP78和CHOP蛋白的表达水平均呈逐渐上升的趋势.结论 MBP和(或)MEHP染毒可致内质网损伤,上调GRP78蛋白和CHOP蛋白的表达,这可能是MBP和(或)MEHP引起小鼠睾丸间质细胞凋亡的重要途径.

关键词：邻苯二甲酸单酯、小鼠睾丸间质细胞、细胞凋亡、内质网应激、CHOP

所属期刊栏目：35

分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：宁夏医科大学校级科研项目XM2018003

在线出版日期：2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：871-876