抗氧化酶抑制剂对肿瘤坏死因子-α诱导HepG2细胞凋亡的影响

摘要：

目的 探索抗氧化酶抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人肝癌HepG2细胞内氧化损伤以及对细胞凋亡发生的影响.方法 将处于对数生长期的HepG2细胞悬液以50 μg/L重组人TNF-α.诱导细胞凋亡8h,建立细胞凋亡模型.将细胞分为正常对照组、凋亡模型组和超氧化物歧化酶(SOD)抑制[2 mmol/L二乙基二硫代氨基甲酸(DETC)]组、过氧化氢酶(CAT)抑制[10 mmol/L氨基三唑(ATZ)]组、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)抑制[0.1 mmol/L青霉胺(PEN)]组、CAT和GPx共同抑制组,暴露2h后,检测细胞内SOD、CAT和GPx的活力;暴露4h后,测定细胞内过氧化氢和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,超氧阴离子和羟自由基的产生能力;暴露12h后,检测细胞存活率、凋亡率和死亡率.结果 凋亡模型组细胞内SOD、CAT、GPx活力及产生超氧阴离子、羟自由基能力和过氧化氢、GSH的含量与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).与正常对照组和凋亡模型组相比,各抑制组细胞内相应抗氧化酶活力均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组和凋亡模型组相比,SOD抑制组及CAT和GPx共同抑制组细胞产生超氧阴离子水平以及CAT和GPx共同抑制组细胞产生羟自由基水平均升高,而SOD抑制组细胞产生羟自由基水平下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);此外,与正常对照组和凋亡模型组相比,SOD抑制组细胞内过氧化氢含量和CAT抑制组细胞内GSH含量均降低,而CAT抑制组、GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞内过氧化氢含量和GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞内GSH含量均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组相比,其他各组细胞的存活率均降低,凋亡率和死亡率均升高,除凋亡模型组和SOD抑制组细胞死亡率外,差异均有统计学意义(P＜0.05).与凋亡模型组相比,各抑制组细胞存活率降低,SOD抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞凋亡率升高,CAT抑制组、GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞死亡率也升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 抗氧化酶抑制剂可通过抑制细胞内抗氧化酶活力破坏细胞内氧化还原平衡,对细胞凋亡的发生造成影响.细胞内氧化还原系统中超氧阴离子可能是促进细胞凋亡发生的关键分子,过氧化氢及其进一步产生的羟自由基可能与细胞死亡密切相关.

关键词：抗氧化酶、抑制剂、肿瘤坏死因子、活性氧、细胞凋亡

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分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：吉林市科技创新发展计划杰出青年项目20166030;吉林市科技创新发展计划第二批科技经费项目20162010

在线出版日期：2019-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：585-589