SIRT1在氢醌诱导TK6细胞凋亡中的作用

摘要：

目的 构建TK6细胞的沉默信息调节因子1(SIRT1)基因沉默细胞株(TK6-shSIRT1),初步探讨SIRT1在氢醌诱导TK6细胞凋亡中的作用.方法 应用慢病毒介导的RNA干扰技术构建TK6细胞的SIRT1沉默细胞株,并用qPCR和Western blotting联合鉴定干扰效果,比较两种细胞的一般生物学特性(细胞形态、细胞增殖能力和细胞周期分布).用不同浓度HQ (2.5 ～40 μmol/L)处理TK6和TK6-shSIRT1细胞48 h后,以CCK-8法检测细胞存活率;以流式细胞术检测细胞周期及凋亡的改变.结果 成功筛选出稳定表达的人淋巴母细胞SIRT1缺陷细胞株,与TK6正常细胞株相比,TK6-shSIRT1细胞中SIRT1在mRNA和蛋白表达水平分别下降了84.6％和94.5％,且生长速度加快了6.57 h,增殖指数增加了11.8％,差异均有统计学意义(P＜0.05),但细胞形态未出现明显改变.经HQ短时间处理后:两种细胞存活率均呈剂量依赖性降低;相同染毒剂量条件下,TK6-shSIRT1细胞的存活率均明显低于TK6细胞(P＜0.05),细胞早期凋亡率高于TK6细胞(P＜0.05).结论 SIRT1缺陷可增加TK6细胞对HQ的敏感性.

关键词：氢醌、沉默信号调节子1(SIRT1)、TK6细胞、凋亡

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分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：2015年广东省普通高校重点平台特色创新类项目自然科学类2015KTSCX052;国家自然科学基金81273116;广东省自然科学基金S2013010015153;东莞市科技计划重点项目2012108101011;东莞市社会科技发展一般项目2017507152413;湛江市非资助科技攻关计划项目2017B01061;广东医科大学面上培育项目M2016012

在线出版日期：2018-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1066-1070