竹荪多糖对亚砷酸钠致人肝细胞毒性的拮抗作用

摘要：

目的 探讨竹荪多糖对亚砷酸钠致人胎肝(L-02)细胞毒性的拮抗作用.方法 将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于含不同浓度[0(对照)～80 μmol/L]亚砷酸钠和[0(对照)～ 160 μg/ml]竹荪多糖+10μmol/L亚砷酸钠的培养液中暴露24 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活率.将处于对数生长期的L-02细胞分设对照(培养基)组、亚砷酸钠(10 μmol/L)组、竹荪多糖(80 μg/ml)组和联合处理(10 μmol/L亚砷酸钠+80 μg/ml竹荪多糖)组,暴露24h后,检测细胞培养液中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽(GSH)、细胞色素C(Cyt-C)水平和天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的活力及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X(Bax)蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,除2.5和5μmol/L亚砷酸钠染毒组外,10～80 μmol/L亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势.与对照组比较,40、80和160μg/ml竹荪多糖联合处理组L-02细胞的存活率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);其中,以80 μg/ml竹荪多糖的拮抗效果最好.与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平升高,T-SOD、CAT及GSH的水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);而竹荪多糖组L-02细胞培养液中上述指标均无明显变化.与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平降低,T-SOD、CAT及GSH的水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞胞内Caspase-3的活力升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);而竹荪多糖组L-02细胞细胞内Caspase-3的活力无明显变化.与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞内Caspase-3的活力均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达水平升高,Bcl-2/Bax比值降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);而竹荪多糖组L-02细胞上述指标均无明显变化.与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞胞内Bax蛋白的表达水平降低,Bcl-2/Bax比值升高;竹荪多糖组L-02细胞内Bcl-2蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 亚砷酸钠可以诱导L-02细胞氧化应激,通过激活线粒体途径的细胞凋亡发挥毒性作用;竹荪多糖可以通过抑制上述机制,拮抗亚砷酸钠所致L-02细胞的毒性作用.

关键词：竹荪多糖、亚砷酸钠、线粒体、细胞凋亡

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分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：国家自然科学基金81160336;贵州省科技厅农业攻关计划项目黔科合NY 字[2011]3055号;贵州省教育厅基金项目黔省专合字[2010]39号;贵州省科技厅黔科合J字[2010]2188

在线出版日期：2016-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：493-497