10.16241/j.cnki.1001-5914.2016.06.005
c-Jun氨基末端激酶在镉致小鼠脑原代星形胶质细胞凋亡中的作用
目的 利用原代培养的小鼠脑星形胶质细胞(astrocytes,AS),探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路是否参与镉致小鼠脑星形胶质细胞凋亡的过程.方法 原代培养的小鼠脑星形胶质细胞给予0~20 μmol/L镉染毒0~24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;给予0~20 μmol/L镉染毒9、12h,采用MTT法检测细胞存活率;给予0~20 μmol/L镉染毒12h,采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;给予0~20 μmol/L镉染毒0~12h,采用蛋白印迹(Westernblotting)法检测JNK磷酸化蛋白的表达水平.结果 镉浓度为5~20 μmol/L时,随染毒剂量的升高及作用时间的延长,细胞形态发生明显改变:细胞间网络连接松散,突起消失,胞体收缩成球形,贴壁能力下降,最终脱落,漂浮于培养液中.与对照组比较,各浓度镉染毒9、12h后小鼠脑星形胶质细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.01);且随着镉染毒浓度的升高和染毒时间的延长,小鼠脑星形胶质细胞的存活率均呈下降趋势.与对照组比较,各浓度镉染毒12h后小鼠脑星形胶质细胞的凋亡率均升高,差异有统计学意义(P<0.01);且随着镉染毒浓度的升高,小鼠脑星形胶质细胞的凋亡率均呈上升趋势.与对照组比较,5~20 μmol/L镉染毒3h后小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK表达量均升高,20μmol/L镉染毒6h后小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK表达量升高,10~20 μmol/L镉染毒9、12h后小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与0h比较,0~20 μmol/L镉染毒3~12h后小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着镉浓度的升高和染毒时间的延长,小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK的表达量均呈上升趋势.结论 镉可能通过上调JNK磷酸化蛋白的表达水平来诱导小鼠脑星形胶质细胞的凋亡.
氯化镉、星形胶质细胞、细胞凋亡、c-Jun氨基末端激酶信号转导通路
33
R994.6(毒物学(毒理学))
贵州省科技厅社会发展攻关项目黔科合SY字[2014]3024号;贵阳市科技计划项目筑科合同[20141001]21号;贵州省科学技术基金黔科合J字[2015]2012号;贵州省科技合作计划项目黔科合LH字[2015]7348号
2016-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
487-492,封3