水中有毒蓝藻的荧光定量PCR检测法

摘要：

目的 建立水中有毒蓝藻的荧光定量PCR检测方法.方法 取20 ml纯培养藻液和500 ml采集水样用0.22 μm滤膜进行过滤,收集藻体提取DNA,应用SYBR Green对微囊藻毒素合成酶基因mcyA进行实时荧光定量PCR检测,根据软件获取的以模板标准品与Ct值建立的标准曲线,计算样品中的mcyA基因拷贝数和产微囊藻毒素(MC)的蓝藻的浓度.结果 在13.8～1.38×106拷贝/L的线性范围内,所得回归方程为y=-3.45 lgx+36.2,r=0.989 9.方法检出限为10.7拷贝/L,加标回收率为88.4％～106.0％,RSD为3.6％～4.0％.应用该方法和传统的显微镜检法对实验室纯培养产毒铜绿微囊藻的检测结果呈正相关(r=-0.994 0,P＜0.05).结论 该方法灵敏度高、精确度高、检测范围宽、重复性好,适合用于蓝藻水华暴发的早期预警.

关键词：荧光定量PCR、有毒蓝藻、微囊藻毒素、mcyA基因、引黄水

所属期刊栏目：33

分类号：R123.1(环境卫生、环境医学)

资助基金：住房与城乡建设部国家水体污染控制与治理科技重大专项2012ZX07404-003;国家科技惠民工程2013GS370202;山东省教育厅泰山学者建设工程专项ts200640025

在线出版日期：2016-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：157-158