长滩军团菌荧光原位杂交探针的设计研究

摘要：

目的 设计一条特异性的长滩军团菌荧光原位杂交探针,并验证其特异性与敏感度,初步建立长滩军团菌的荧光原位杂交检测法.方法 以长滩军团菌16S rRNA特异性位点设计杂交探针.在数据库中对探针序列进行特异性检验,优化反应条件,以军团菌标准菌株和环境分离菌株验证探针的特异性,并以模拟水样验证探针灵敏度.结果 生物信息学分析表明,设计的探针LEG long序列与长滩军团菌16S rRNA序列完全配对,与其他军团菌种均存在1个碱基以上的错配.菌株验证实验证明LEG long探针可与长滩军团菌的标准菌株和环境分离株特异性杂交,与其他军团菌种和非军团菌属菌株无杂交信号.探针检测灵敏度可达1.49×103CFU/ml.结论 本研究设计的探针LEG long可用于长滩军团菌的高特异性和高灵敏度检测.

关键词：长滩军团菌、荧光原位杂交、探针

所属期刊栏目：31

分类号：R117(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31270049;国家自然科学基金青年基金31300004

在线出版日期：2014-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：47-50