尿道致病性大肠杆菌fimA基因的克隆与表达

摘要：

目的 对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)132编码Ⅰ型菌毛的结构基因fimA进行克隆与表达,建立免疫学检测方法.方法 采用PCR方法扩增fimA基因,定向克隆pET32a载体,原核表达获得FimA重组蛋白；免疫小鼠制备FimA多克隆抗体；建立全菌ELISA方法,检测UPEC 132的Ⅰ型菌毛表型.结果 PCR扩增imA全基因,构建重组质粒pET32a-fimA,经转化构建重组菌E.coli BL21(DE3)/pET32a-fimA；经IPTG诱导表达及镍亲和层析纯化获得重组蛋白FimA；制备的FimA多克隆抗体效价≥1:51 200,Western blot显示其良好的特异性；全菌ELISA获得满意结果.结论 成功地克隆UPEC Ⅰ型菌毛的结构基因fimA,制备的多克隆抗体为UPEC的检测和致病性的研究奠定了基础.

关键词：尿道致病性大肠杆菌、fimA、克隆、表达、全菌ELISA

所属期刊栏目：30

分类号：R117(卫生基础科学)

资助基金：教育部高等学校博士点基金20070062010

在线出版日期：2013-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：223-225