食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素和葡萄球菌A蛋白的多重PCR检测法
目的 建立食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素luk-F、luk-S和葡萄球菌A蛋白SPA基因的多重PCR检测方法.方法 设计luk-F、luk -S和SPA基因的引物,利用单重PCR方法和测序验证引物的特异性;建立多重PCR快速检测方法,并对方法的特异性进行评价.结果 利用单对引物对实验室的多个菌株进行盲筛,出现的条带均为单一条带,且与目的片段长度一致.多重PCR反应体系:25μl套装反应液2,上、下游引物(20 μmol/L)各0.4μl,0.25μl套装反应液1,基因组模板6μl,加超纯水至50μl.扩增条件:94℃预热2 min;94℃保持30 s,54℃保持60 s,72℃保持60 s,34个循环;72℃延伸5 min.结论 该方法对金黄色葡萄球菌有很好的特异性,快速简便,可以同时对大量菌株进行筛选.
食源性金黄色葡萄球菌、杀白细胞毒素、葡萄球菌A蛋白
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R117(卫生基础科学)
石家庄市科学技术研究与发展指导计划111461683
2012-12-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
734-736