3种真核藻类DNA提取方法比较
目的 建立一种简单、快速、高效的从自然水样中提取藻类总DNA的方法.方法 通过DNA产物的浓度和纯度、DNA产物的完整性及PCR扩增的比对,对3种真核藻类DNA的提取方法[纤维素酶法、改良十六烷基三乙基溴化铵(CRAB)法和超声波破碎试剂盒法]进行比较.结果 3种方法得到的基因组DNA均较完整,片段大小都在23 kb左右;且3种方法得到的DNA浓度均较高.CTAB法和试剂盒法提取得到的总DNAA260nm/A280nm.的比值分别为1.767和1.824,并且A260nm/A230nm比值均在1.9以上,说明提取得到的总DNA纯度较高,且PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测得到明亮的条带.而纤维素酶法得到的DNA的A260nm/A280nm比值与A260/A230nm比值分别为1.617和1.522,表明盐及蛋白质污染较前两者严重.结论综合考虑后,认为CTAB方法更适合从自然水样中提取藻类DNA.
DNA提取方法、纤维素酶法、藻类、改良CTAB法
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R117(卫生基础科学)
国家科技支撑计划2012BAJ25B03
2012-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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