微囊藻毒素-LR的纳米均相时间分辨荧光免疫分析法

摘要：

目的 建立了微囊藻毒素-LR( MC-LR)的纳米均相时间分辨荧光免疫分析（nano-homogeneous time-resolved fluoroimmunoassay,NHTRFIA）法。方法 制备MC-LR抗原包被发光微粒[加入1 mg发光微粒、偶联MC-LR的牛血清白蛋白( MC-LR-BSA)、人工抗原0.05 mg、0.4 mol/L氰基硼氢化钠溶液10μl，于37℃避光振荡反应48 h；加入0.3 mol/L的羧甲氧基胺半盐酸盐溶液(pH=5.0)10μl,以封闭未结合位点，于37℃避光孵育1h后离心]；在微孔中加入上述发光微粒、MC-LR标准品或样品、生物素化抗MC-LR单克隆抗体各25μl，于37℃孵育30 min，然后加入175μl包被链亲和素的感光微粒于37℃孵育10 min,采用纳米均相时间分辨荧光检测仪进行检测。结果 该方法所得回归方程为y=-1812x2-6075x+12424(R2=0.9976),检出限为0.02 ng/mL，批内RSD为5.8％～7.2％,批间RSD为9.5％～9.9％，平均回收率为85.0％～120.0％。结论 该方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、操作简便、耗时短、测定范围宽、试剂寿命长的优点，尤其适合于生活饮用水中微量MC-LR的分析。

关键词：纳米均相时间分辨荧光免疫分析法、微囊藻毒素-LR、单克隆抗体

所属期刊栏目：28

分类号：0657.6

资助基金：江苏省卫生厅科研基金HD200865

在线出版日期：2011-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：714-716