p73和GADD45α蛋白在邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯致人正常肝细胞L02和人肝癌细胞Hep3B周期阻滞中的作用
目的 研究抑癌基因p73和生长抑制及DNA损伤诱导基因45α(GADD45α)蛋白对邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[di( 2-ethylhexyl )phthalate,MEHP]染毒人正常肝细胞L02和人肝癌细胞Hep3B周期的影响。方法 将处于对数生长期的L02细胞和Hep3B细胞分别暴露于终浓度为0(溶剂对照,DMSO终浓度<1‰)、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μmol/L的MEHP溶液染毒细胞12h。采用四甲基氮唑蓝(methyhhiazoletetrazolium,MTT)比色法检测细胞增值率,采用流式细胞仪检测细胞的周期时相,采用Western blot法检测细胞周期调控蛋白p53、p73和GADD45α的表达量。结果 与溶剂对照组相比,仅50 μmol/L MEHP染毒L02细胞的增殖率升高(P<0.05),各浓度MEHP染毒Hep3B细胞的增殖率均下降(P<0.01),差异有统计学意义。与溶剂对照组相比,仅100μmol/LMEHP染毒L02细胞的G1期和G2期细胞构成比下降,S期细胞构成比上升,差异均有统计学意义(P<0.05);而100 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的G1期和25.00、50.00、100.00μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的S.期细胞构成比下降,50.00和100.00 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞的G2期细胞构成比上升,差异均有统计学意义(P<0.01)。与溶剂对照组相比,各浓度MEHP染毒L02细胞均未见p53、p73和GADD45α蛋白表达量明显增加,差异无统计学意义;而各浓度MEHP染毒Hep3B细胞p73蛋白表达量和50.00、100.00 μmol/L MEHP染毒Hep3B细胞GADD45α蛋白表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 一定浓度MEHP(50 μmol/L和100 μmol/L)可能通过独立于p53途径诱导p73和GADD45α蛋白表达增加而导致p53基因缺失的Hep3B细胞阻滞在G2期。
邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯、细胞周期、p73基因、生长抑制及DNA模仿诱导基因45α
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R994.6(毒物学(毒理学))
国家自然科学基金面上项目30972437
2011-12-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
663-646