筛选肝细胞p53启动子结合蛋白的噬菌体表面展示技术

摘要：

目的 筛选p53启动子结合蛋白,探讨p53对肝细胞调节的分子生物学机制.方法 应用噬菌体表面展示技术,以p53作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA测序和生物信息学分析.结果 噬菌体经5轮富集后,成功构建了噬菌体p53展示文库,该文库包含与p53结合的肝细胞蛋白有17种.其中2个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码人α2HS糖蛋白(AHSG)、人D4、锌指蛋白家族2(DPF2)、凋亡反应锌指基因(REQ)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子结合蛋白、氨基甲酰磷酸合成酶1、磷酸化酶激酶、酪氨酸氨基转移酶、酪蛋白激酶细胞周期素激酶、谷胱甘肽过氧化物酶、组蛋白结合蛋白3、跨膜蛋白2、血清黏蛋白2、有核红细胞白血病病毒癌基因2、毛细管扩张失调症突变基因,涉及到细胞发育和代谢、细胞外基质、细胞周期调控、信号转导、细胞凋亡以及原癌基因.结论 噬菌体表面展示技术成功筛选出了肝细胞p53启动子结合的多种类型和功能蛋白.

关键词：噬菌体表面展示技术、p53、肝细胞

所属期刊栏目：28

分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：新疆自治区自然科学基金2009211B10;教育部博士点专项基金20096517120001

在线出版日期：2011-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：588-591