pEGFP基因启动子区甲基化的梯度降落PCR定量检测法

摘要：

目的 改进亚硫酸氢钠测序法,并在CMV基因启动子甲基化检测中进行验证.方法 提取pEGFP-C3质粒重组人肝癌细胞株HepG2 DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后质粒基因CMV启动子序列设计特异引物并结合梯度降落PCR扩增,T-A载体克隆、测序,目标区域甲基化定量.结果 pEGFP-C3质粒基因约600 bp的CMV启动子区甲基化水平可以精确定量,检测结果与标准品一致,重复测量结果稳定.结论 改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增,提高PCR效率,更适于基因甲基化状态的检测.

关键词：基因、亚硫酸氢钠测序法、甲基化、梯度降落PCR、CMV启动子、pEGFP-C3

所属期刊栏目：27

分类号：R994.6(毒物学（毒理学）)

资助基金：国家自然科学基金20907047;中央级公益性科研院所基本科研业务专项2008KYYW05

在线出版日期：2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：396-399