工程菌表达融合型酯酶B1发酵条件的优化

摘要：

目的 提高酯酶B1融合蛋白的表达量,研究pThioHisA-B1/DH5a工程菌株的最优发酵条件.方法 依次在不同的培养基(LB,SOB,YT,TB)、诱导时间(1-8 h)、诱导剂浓度(0.3-1 mmol/L)、诱导温度(25～37℃)等因素变化下,研究融合蛋白的表达量;目的 产物经SDS-PAGE电泳和薄层凝胶扫描,以获得最佳表达条件.结果 工程菌优化的发酵条件为,最适宜的培养基为TB,诱导剂IPTG的最佳浓度为0.4 mmol/L,最佳诱导时间为6 h,最佳诱导温度为28℃.工程菌在最佳条件下表达时,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40.3%,其中66.2%为可溶性蛋白.结论 本实验筛选出了工程菌的最优化发酵条件,利用本实验的优化条件可获得高产量、可溶性的酯酶B1融合蛋白,为酯酶B1的进一步放大生产和实际应用奠定了基础.

关键词：环境微生物学、酯酶B1、融合蛋白、工程菌

所属期刊栏目：26

分类号：R117(卫生基础科学)

资助基金：山东省自然科学基金Y98D16064

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：490-493