改进型重组基因酵母TR-GRIP1检测化合物甲状腺激素干扰活性

摘要：

应用酵母双杂交技术构建重组TR(甲状腺激素受体)基因酵母,用以检测类/抗甲状腺激素化合物及环境样品的甲状腺激素干扰活性.提取并纯化含有TR基因的醉母表达质粒pGBT9-TR以及含有TR共激活因子GRIP1基因的酵母表达质粒pGAD424-GRIPI,将pGBT9-TR和pGAD424-GRIPI同时转化至酵母细胞Y187,以营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)筛选阳性菌落,构建TR-GRIP1双杂交酵母.考察该酵母与天然甲状腺激素--T3(三碘甲状腺原氨酸)的结合情况,确定最佳暴露时间,建立剂量-效应关系曲线.结果表明:TR-GRIP1双杂交酵母能够与T3结合诱导β-半乳糖苷酶活性,选择暴露时间为2 h,T,诱导酶活性的EC50值为1.1×10(-7)mol/L;构建的重组基因酵母TR-GRIP1提供了检测化合物甲状腺激素干扰活性的新方法.

关键词：甲状腺激素干扰物、酵母双杂交、甲状腺激素受体、重组基因酵母

所属期刊栏目：24

分类号：X703.5(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金项目41001351;高等学校博士学科点专项科研基金项目20100003120024

在线出版日期：2012-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1172-1177