明亮发光杆菌培养的响应面优化及其对常见金属离子的毒性评价研究
随着人们对金属毒性认识的不断深入,对生物毒性检测方法的灵敏度提出了更高的要求.以发光度为响应值,通过响应面法对传统的明亮发光杆菌(Photobacteriumphosphoreum)培养基中主要组分的浓度进行了优化,得到了最佳培养基组成:氯化钠(25.00 g·L-1)、胰蛋白胨(4.010 g·L-1)、酵母浸出液(1.200 g·L-1)、甘油(2.475 g·L-1),在此条件下培养14 h后,发光细菌的发光度达到l.7×l09 RLU,比优化前增加了1倍,菌浓度达到0.85,较优化前增加了5%.在优化培养基组分浓度的基础上,对其他条件(接种量、pH值、温度)进行了单因素发光度影响分析,发现在接种量1%(初始种子液OD595为0.003),测定环境22~25℃,样品pH值为6~8的条件下,利用优化培养基进行急性毒性测定基本不会影响发光度.随后,基于优化后的培养条件对常见金属离子的急性毒性进行了评价,结果表明:除Fe2+、Zn2+、K+外,优化条件培养的明亮发光杆菌对其余金属离子的灵敏度都有所提高,其中对Cr6+毒性的灵敏度提高最大,其检出限从1.0 mg.L-1提高到0.15mg·L-1,IC50下降了47.13%(由7.818 mg·L-1下降到4.133mg·L-1),能更好地满足不同行业对Cr6+检出限的要求.本实验提出了一种通过优化培养基来提高金属离子毒性测定灵敏度的方法.
六价铬、发光细菌、灵敏度、毒性测定
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X171.5(环境生物学)
国家重点研发计划No.2019YFB2103003
2022-06-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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