微丝菌（Microthrix parvicella）原位荧光杂交（FISH）定量过程的条件优化

摘要：

微丝菌(Microthrix parvicella)是世界范围内诱发活性污泥膨胀现象的主要丝状菌之一,它在活性污泥中准确的原位定量解析对污泥膨胀现象及控制策略研究具有非常重要的意义.由于微丝菌自身的特殊生理生化性质(如表面高疏水性及较厚细胞壁)易导致常规荧光原位杂交(FISH)过程中定量结果偏低.本研究针对 FISH 过程中存在的探针渗透率低、荧光信号偏弱等现象,从活性污泥样品前处理、杂交过程条件等方面对 Microthrix parvicella 的 FISH 定量过程进行了优化.结果表明,在前处理使用溶菌酶(浓度为36000 U?mL -1),探针浓度为4.5 ng?μL -1,杂交时间延长至4 h 的条件下,Microthrix parvicella 的 FISH 定量结果可从1.12％提高至96.70％,并与定量 PCR(q-PCR)结果和 Eikelboom ﹠ Jenkins 法(镜检观察)定量结果更为趋近一致.

关键词：污泥膨胀、微丝菌、FISH 技术、优化、定量

所属期刊栏目：37

分类号：X172(环境生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目51378489,31170468

在线出版日期：2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2266-2270