CRISPR/Cas12b核酸检测试剂的冻干配方筛选与优化

摘要：

为解决现有CRISPR/Cas12b核酸检测试剂需要冷链储运的问题,选取海藻糖、乳糖、蔗糖、普鲁兰多糖、酪蛋白、麦芽糊精、松三糖和甘露醇等8种常用的冻干保护剂,以真空冷冻干燥后相对酶活和物理状态为指标,通过对不同浓度保护剂的单因素试验和正交试验,筛选与优化冻干配方.结果表明,海藻糖、普鲁兰多糖和甘露醇具有较好的冻干保护性,且冻干产物物理性状较好,便于使用.最终确定的冻干配方为海藻糖0.14 g/mL,普鲁兰多糖0.06 g/mL,甘露醇0.06 g/mL.使用该配方制备的CRISPR/Cas12b冻干试剂,初始相对酶活为93.33%,在25℃保存60 d或37℃保存30 d后的相对酶活分别为81.04%和81.28%,具有良好的常温保存性,可用于进一步制备快速核酸检测试剂.

关键词：CRISPR/Cas12b、核酸检测、真空冷冻干燥

所属期刊栏目：32

分类号：Q814.4(生物工程学(生物技术))

资助基金：江苏省研究生科研与实践创新计划项目KYCX2021-038

在线出版日期：2023-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：43-48