弧菌外膜蛋白OmpK多肽免疫原制备及其免疫原性研究

摘要：

外膜蛋白OmpK在弧菌属中保守性大于79％,是有良好应用前景的诊断和疫苗抗原,但弧菌属保守并且暴露在膜外的OmpK肽段有限,多肽免疫原免疫效果相比完整蛋白可能更具优势.采用Protein蛋白序列分析软件分析弧菌外膜蛋白OmpK,筛选出2条在弧菌属内广泛保守,同时亲水性和表面暴露性较好的多肽P1和P2.将合成的多肽与BSA蛋白偶联制备成多肽免疫原,免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.间接ELISA结果显示,2条多肽免疫原抗血清对OmpK蛋白的效价均达到1:81000,对弧菌菌体的效价P1-BSA免疫血清高于P2-BSA免疫血清.通过Western blot分析发现,多肽的抗血清均能与重组OmpK蛋白(27 kDa)以及测试的7株副溶血弧菌和1株创伤弧菌全菌蛋白发生免疫反应,P1多肽抗血清与2株气单胞菌,P2多肽抗血清与3株肠杆菌,存在不同程度的交叉反应.结果 表明,OmpK的P1和P2多肽是弧菌共有的抗原表位,免疫血清对菌体识别较弱的原因有待进一步研究.

关键词：弧菌、外膜蛋白OmpK、多肽免疫原、抗体

所属期刊栏目：29

分类号：S941.42(水产保护学)

资助基金：江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室开放课题;江苏省研究生科研与实践创新计划项目

在线出版日期：2020-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：15-21