多酶级联催化合成(R)-β-酪氨酸
目前报道的β-酪氨酸生产方法需要较为复杂的底物而且大多依赖于贵金属催化剂.为了实现生物法绿色合成β-酪氨酸,通过人工设计的级联反应,将酪氨酸酚裂解酶和酪氨酸氨基变位酶进行级联,以苯酚、丙酮酸和铵盐等廉价化合物为底物合成(R)-β-酪氨酸.通过基因挖掘筛选了所需的酶元件,并采用蛋白质工程改造,提升了限速酶的催化效率.在大肠杆菌宿主中对所筛选的酶进行共同表达,经优化获得了(R)-β-酪氨酸合成菌株E.coli S10.在1 L规模反应中,菌株E.coli S10合成(R)-β-酪氨酸的转化率达到78%,ee值>99%.利用高分辨质谱(HRMS)和核磁共振图谱(NMR)分别鉴定了纯化产物的分子量和结构,结果表明通过该级联路径可成功合成目标产物(R)-β-酪氨酸.研究工作可为(R)-β-酪氨酸的绿色酶法生产提供理论指导.
酶;生物催化;生物技术;多酶级联催化;(R)-β-酪氨酸
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Q814(生物工程学(生物技术))
广东省重点领域研发计划项目;国家自然科学基金;江苏省重点研发计划项目
2022-02-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共10页
352-361