人免疫球蛋白G酶解制备Fab和Fc片段及其分离纯化

摘要：

为了制备抗体Fab和Fc片段,采用木瓜蛋白酶酶解人免疫球蛋白G(IgG),通过优化酶解条件和色谱法分离过程,得到了纯度较高的Fab片段和Fc片段.考察了酶解pH、酶加入量、添加半胱氨酸和酶解时间等对IgG酶解过程的影响,优化了酶解条件,提高酶解效率,IgG转化率大于98％.酶解产物通过Protein A亲和色谱法和DEAE阴离子交换色谱法进行了纯化,分离得到Fc片段和Fab片段,收率分别为72.6％和40.1％.经SEC-H PLC分析,Fc片段纯度达95.7％,Fab片段纯度达96.6％.

关键词：人免疫球蛋白G、Fc片段、Fab片段、木瓜蛋白酶、亲和色谱法、离子交换色谱法

所属期刊栏目：64

分类号：TQ028(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金;浙江省自然科学基金

在线出版日期：2013-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1750-1756