10.16085/j.issn.1000-6613.2017-1553
产壳聚糖酶菌株ncps116发酵条件优化及其酶学性质
通过形态学观察、生理生化实验及16S rDNA 序列分析鉴定产壳聚糖酶菌株 ncps116为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).通过单因素和正交实验对该菌株发酵产酶条件进行了优化.结果表明其最适产酶条件为:粉末壳聚糖15g/L,硫酸铵30g/L,初始pH 6.0,温度32℃,发酵时间72h,500mL三角瓶装液量120mL,接种量4%,在此条件下该菌株产壳聚糖酶活力达43.89U/mL.经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析对菌株发酵液中的壳聚糖酶进行了纯化,并对其酶学性质进行了初步研究.结果表明,壳聚糖酶经 SDS-PAGE分析,其分子量为4.37万.该酶酶促反应最适pH和最适反应温度分别为5.6和50℃,在低于40℃、pH 3.6~5.6范围内较为稳定,5mmol/L 的 Mn2+对该酶酶活力有明显的增强作用,Cu2+、Ni2+、Fe3+、Ag+对该酶酶活力有不同程度的抑制作用.壳聚糖酶酶促反应的米氏常数(Km)为11.10mg/mL,最大反应速率(Vmax)为1.38μmol/(min·mL),对底物表现出较强的专一性.此外,该酶能够抑制黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝的生长.
壳聚糖酶、发酵条件优化、分离纯化、酶学性质、蜡状芽孢杆菌
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Q936(微生物学)
国家科技支撑计划2015BAD16B02;山东省自然科学基金ZR2016YL031,ZR2016YL022;山东省农业科学院农业科技创新工程CXGC2017A01,CXGC2017B06;山东省农业重大应用技术创新课题鲁财农指2015[16]项目
2018-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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