工程菌发酵产酶及其在1,3-丙二醇耦合酶催化制备中的应用

摘要：

培养定向进化后的质粒保藏菌E. coli BL21(DE3)pLysS /PET-15b-dhaT'-24 并进行质粒抽提,将抽提的质粒转化入感受态宿主细胞E. coli BL21(DE3)pLysS中得产1,3-丙二醇氧化还原酶的工程菌.工程菌经乳糖诱导后进行发酵培养获得酶活为182 U/mL的1,3-丙二醇氧化还原酶,最适反应pH值为10,pH值稳定范围为7.0～9.0,最适反应温度为55 ℃,温度稳定范围为30～45 ℃.利用工程菌产的1,3-丙二醇氧化还原酶进行转化3-羟基丙醛为1,3-丙二醇的反应,同时偶联甘油脱氢酶(由另一工程菌制备)转化甘油的反应进行辅酶NADH的再生,实现了1,3-丙二醇的双酶耦合的连续反应.由于来源于工程菌的双酶酶学性质相适应,反应连续进行34 h后,底物3-羟基丙醛的转化率达63.4%,产物1,3-丙二醇的产率达64.6%.

关键词：1、3-丙二醇氧化还原酶、工程菌、辅酶再生、3-丙二醇

所属期刊栏目：29

分类号：TQ923(其他化学工业)

资助基金：国家863计划子课题2006AA020103;国家自然科学基金资助项目20676048

在线出版日期：2013-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2143-2148