源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶的分离纯化与反应机制

摘要：

使用两步发酵法培养博伊丁假丝酵母(Candida boidinii),菌株细胞经破碎与分离所得粗酶液经DEAE SepHaroses Fast Flow层析快速纯化获得NAD+依赖型的甲酸脱氢酶,酶的比活从0.83 U/mg提高到2.67 U/mg,纯化倍数和回收率分别为3.22倍和29.7%.研究了从反应物消耗到产物生成之间的酶反应历程,确定了甲酸脱氢酶的酶促反应为有序BiBi反应机制,其中NAD+是第一底物,HCOONa是第二底物,NADH是首先释放的第一产物,HCO3-是随后释放的第二产物;二次作图法求解出Vmax、KiS1、KmS2、KmS1等动力学参数,确定甲酸脱氢酶有序BiBi反应速度方程为…….

关键词：甲酸脱氢酶、反应动力学、辅酶再生

所属期刊栏目：28

分类号：TQ923(其他化学工业)

资助基金：国家863计划子课题2006AA020103;国家自然科学基金20676048项目

在线出版日期：2013-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1808-1813,1827