10.3321/j.issn:1000-6613.2008.04.011
1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与原核表达
大肠杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶被yqhD的基因编码,能催化羟基丙醛生成1,3-丙二醇.采用PCR方法从大肠杆菌中扩增到yqhD,测序结果显示该片段大小为1164bp.将目标片段克隆到原核表达载体pET28(α+)中并转化到大肠杆菌Novablue,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定,结果表明克隆得到的yqhD基因能在大肠杆菌Novablue-pET28中实现蛋白表达;在25℃条件下,IPTG诱导12h后,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到124 U/mg,而野生型的酶活力仅为1.4 U/mg;重组菌全细胞发酵结果显示,产物1,3-丙二醇的产率能达到65%,而野生型仅为9.5%.
1、3-丙二醇氧化还原酶同工酶、克隆、原核表达、yqhD 基因
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TQ923(其他化学工业)
上海市优秀青年科研专项基金072284;上海市教委重点攻关项目072284
2008-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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527-530